Раствор Рингера для млекопитающих
Пробирки для образцов
Бинокулярный микроскоп
Набор анатомических инструментов
Дистиллированная вода
Пластинка для тонкослойной хроматографии
Проволочная петля
Хроматографический бачок с крышкой
н-Бутанол
Ледяная уксусная кислота
Вытяжной шкаф
Пульверизатор с нингидрином
Сушильный шкаф на 100°С
1. Используя крысу, препарированную в опыте 10.3,А, перевяжите и удалите по отдельности желудок, тонкий кишечник и толстый кишечник. Разрежьте их и смойте содержимое каждого участка в отдельные, помеченные пробирки, в которые предварительно налейте раствор Рингера для млекопитающих.
2. Сделайте тонкие срезы со стенок каждого из отделов и исследуйте их под бинокулярным микроскопом. Рассмотрите и опишите вид их внутренней поверхности.
3. Добавьте к содержимому пробирок небольшое количество дистиллированной воды, встряхните и оставьте на 15 мин отстаиваться.
4. Отберите из каждого образца каплю прозрачной надосадочной жидкости, нанесите на отдельную тонкослойную пластинку и подсушите. Повторите процедуру, чтобы нанести на хроматограмму достаточное количество образца. После того как пятна высохнут, поместите пластинки в хроматографический бачок, на дно которого налита слоем толщиной в 1 см смесь растворителей, состоящая из н-бутанола, ледяной уксусной кислоты и воды в соотношении 40:10:15, и накройте бачок крышкой (рис. 10.33).
5. Оставьте пластинки в бачке на 90 мин, а затем выньте их, высушите в вытяжном шкафу и опрыскайте нингидрином.
6. Прогрейте пластинки в сушильном шкафу при 100°С.
7. Отметьте на пластинках пятна фиолетового и других цветов. Эти пятна указывают на присутствие в исследуемых образцах аминокислот. (Данное практическое занятие взято из Nuffield A-level Biology Maintenance of the organism.)
Рис. 10.33. Приготовление тонкослойной хроматограммы
Опыт 10.4. Изучение переваривания и всасывания на модели кишки
Только что забитая крыса
Часовые стекла
1%-ный раствор крахмала
Три диализные трубки (Visking tubes) по 15 см длиной
Вата
Пробирки для кипячения
Бумажные хомутики
Водяная баня на 30°С
Таймер
Раствор Люголя
Раствор Бенедикта
Асбестовое полотенце
Пробирки и штативы
Пипетка
1. Забейте крысу, вскройте ее, перевяжите и извлеките по отдельности желудок, тонкий и толстый кишечник.
2. Поместите их порознь на часовые стекла и залейте сверху 1%-ным раствором крахмала. Размельчите ткань и перемешайте ее с раствором крахмала.
3. Возьмите три диализные трубки диаметром 1 см и длиной 15 см и завяжите их с одного конца узлом.
4. Слейте размельченную ткань каждого отдела пищеварительного тракта порознь в три диализные трубки и долейте сверху раствор крахмала до общего объема 10 мл. Тщательно все перемешайте.
5. Поместите диализные трубки по отдельности в пробирки для кипячения, содержащие по 10 мл дистиллированной воды, а чтобы их открытые концы не упали в воду, прикрепите их к стенке пробирки с помощью бумажных хомутиков.
6. Поставьте контрольный опыт с диализной трубкой, в которую налито только 10 мл 1%-ного раствора крахмала.
7. Поместите все пробирки в водяную баню с температурой 30°С на 30 мин. 8. Через 30 мин проведите следующие пробы с каждой пробиркой и ее содержимым:
а) Отберите каплю раствора из каждой диализной трубки и с помощью раствора Люголя проверьте его на содержание крахмала.
б) Отберите еще одну каплю содержимого каждой трубки и определите в нем содержание редуцирующих Сахаров с помощью раствора Бенедикта. Полученные результаты запишите.
в) Проведите в каждом случае пробу на крахмал и редуцирующие сахара в воде, окружающей диализную трубку.
9. Сведите полученные результаты в таблицу.
10. Имеются ли доказательства того, что ткань пищеварительного тракта превращает крахмал в редуцирующие сахара, и если такие доказательства имеются, то в каком участке пищеварительного тракта образуется наибольшее количество Сахаров?
11. Что говорят ваши наблюдения о природе диализных трубок?
10.5 . Регуляция секреции пищеварительных желез
Секреция пищеварительных ферментов требует затраты энергии, и, если бы она происходила непрерывно, тем более в отсутствие пищи, это было бы слишком большим расточительством для организма. В действительности же основная масса пищеварительных соков образуется только тогда, когда есть, что переваривать. Таким образом осуществляются общая координация и регуляция процесса пищеварения как упорядоченной последовательности определенных стадий.