С середины 15 — начала 16 вв. начались вторжения турецких и татарских войск из Крымского ханства в Галицию и Подолию. В 1482 сильно пострадал Киев, опустошённый войсками Менгли-Гирея . В последующие годы вторжениям подвергались Киевщина и Подолия. В освободительной борьбе украинского народа и защите У. от вторжения вражеских полчищ активно участвовали украинские казаки (см. также Казачество ). В 16 в. образовался центр казачества — Сечь Запорожская . С конца 15 в. большую роль в борьбе украинского народа против иноземных захватчиков начинает играть Русское централизованное государство, ставшее опорой У. в её борьбе за свободу и независимость. Ведя борьбу против польско-литовских феодалов и крымских татар, Русское государство объективно способствовало и освобождению У. В результате войны с Великим княжеством Литовским (1500—03) к Русскому государству была присоединена почти вся Черниговщина.
С середины 16 в. положение У. значительно ухудшилось. По Люблинской унии 1569 Литва объединилась с Польшей в одно государство — Речь Посполитую, в состав которой вошли и украинские земли — Волынь, Восточная Подолия, Киевщина, часть Левобережья. Крупнейшие польские магнаты начали захват земель на У. Во владениях отдельных магнатских семей насчитывались сотни городов и сёл. Переходы крестьян всё более ограничивались, а в 1588 по 3-му Литовскому статуту (см. Литовские статуты ) были совсем прекращены. Крестьяне превратились в бесправных крепостных. В тяжёлом положении находилось и население городов. Всё это сопровождалось национально-религиозным гнётом. Польско-католическое население пользовалось различными льготами в промыслах, торговле и т.д., а украинцы ограничивались в правах. В борьбе У. за независимость важное место принадлежит крестьянско-казацким восстаниям конца 16 в., в которых наряду с крестьянами и городской беднотой принимали участие запорожские казаки. Реестровое казацкое войско (см. Реестровые казаки ), созданное во 2-й половине 16 в. польским правительством для борьбы с народными движениями и защиты У. от татаро-турецких набегов, в массе своей также было недовольно притеснениями польских магнатов. Крестьянско-казацкое выступление 1591—93, охватившее Киевщину, Подолию, Волынь, возглавил гетман К. Косинский . В 1594 вспыхнуло восстание во главе с С. Наливайко . Оно охватило также часть Галиции и Белоруссии, но было жестоко подавлено польскими властями в 1596.
По Брестской унии 1596 православная церковь на территории Речи Посполитой была объединена с католической в униатскую церковь. Уния была провозглашена, несмотря на протест большинства украинского духовенства и всего украинского народа. По У. распространилось антиуниатское движение. Большую роль в нём сыграли украинские города, где возникали культурно-религиозные организации — братства , которые учреждали школы и типографии, выпускали литературу, направленную против унии и католицизма.
После поражения крестьянско-казацких восстаний конца 16 в. на У. значительно усилился феодально-крепостнический гнёт. Вспыхнувшее в 1606 крестьянское восстание под предводительством И. И. Болотникова (см. также Крестьянская война начала 17 в. ) началось на территории Чернигово-Северщины. Украинские казаки, крестьяне и городская беднота приняли в этой войне активное участие. В 1-й половине 17 в. украинский народ продолжал борьбу против турецких и татарских захватчиков. Казаки предпринимали походы на Варну, Белгород, Килию, Измаил, Трапезунд, Синоп, Стамбул. В 1616 казаки взяли Кафу, в 1621 сыграли важную роль в победе войск Речи Посполитой над турками под Хотином, в 1637—42 запорожцы помогали донским казакам оборонять Азов (см. Азовское сидение ). С 30-х гг. 17 в. массы украинских крестьян и казаков переселялись на степную окраину Русского государства (см. Слободская Украина ). Во 2-й четверти 17 в. на У. усилилось освободительное движение, целью которого было избавление от польско-шляхетского владычества и воссоединение с Россией. В мае 1630 началось крестьянское восстание с участием казаков под руководством Тараса Федоровича (Трясило). Движение охватило территории Киевщины и Полтавщины. В 1635 повстанцы во главе с И. Сулимой разрушили крепость Кодак , построенную польскими властями для преграждения пути крестьянам в Запорожскую Сечь. Новое восстание поднялось в 1637 под руководством П. М. Бута (Павлюка). В 1638 антифеодальная борьба охватила почти всю Левобережную У. Предводителями восставших были Я. Острянин и К. Скидан. Поражение заставило Острянина с частью казаков перейти в русские владения и поселиться на Слободской У. Повстанцы во главе с Д. Гуней продолжали героическую борьбу, а затем также перешли на территорию Русского государства.
Положение украинского народа к середине 17 в. стало особенно тяжёлым. Магнаты и шляхта продолжали захватывать крестьянские и казацкие земли, закрепощали крестьян, грабили мещан. Притеснениям подвергались и низы реестрового казачества, мелкая украинская шляхта, рядовое православное духовенство. Всеобщее недовольство и протест вылились в Освободительную войну украинского народа 1648—54 , приведшую в 1654 к воссоединению У. с Россией. Борьбу народа против гнёта шляхетской Польши возглавил Богдан Хмельницкий .
Учитывая многократные просьбы представителей украинского народа и опасность, угрожавшую его существованию со стороны польских и турецко-татарских захватчиков, русское правительство созвало в Москве 1 октября 1653 Земский собор, принявший решение о воссоединении У. с Россией и объявлении войны Польше (см. Русско-польская война 1654—67 ). Затем состоялась Переяславская рада 1654 , которая 8 января также приняла решение о воссоединении У. с Россией. Мартовскими статьями 1654 было оформлено автономное положение У. в составе России, а также определены права и привилегии казацкой старшины, украинской шляхты и верхушки духовенства. Воссоединение У. с Россией было осуществлением давних стремлений и надежд украинского народа. Оно явилось поворотным этапом в его истории и сыграло великую прогрессивную роль в его дальнейшем экономическом, политическом и культурном развитии.