а — нормальная инфузория, видно много одинаковых ядер и ресничек, при помощи которых движется паразит; б — инфузория спустя сутки после её смерти от летучих фитонцидов лука, все структуры (ядра, реснички и другие) стали ещё более отчётливыми; в — начинающийся распад той же инфузории, реснички и ядра исчезают, на поверхности появляются пузыри.
Некоторые простейшие под влиянием фитонцидов умирают, сохраняя своё строение, все свои основные структуры — ядро, реснички, благодаря которым осуществляется движение, и т.д. Более того, эти структуры становятся отчётливее — при умирании как бы закрепляется их строение. Микроорганизм умер, но он кажется нормальным. В таком состоянии микроб может находиться час, другой, третий и даже сутки и дольше. Затем уже начинается саморазложение — очень сложное химическое явление распада белков и других соединений. Примером такого явления может служить фиксация структур и последующий распад у инфузории, называемой опалиной, паразитирующей в кишечнике лягушки (рис.15).
От чего же зависит форма умирания? Не получается ли различная картина смерти от одного и того же фитонцида в зависимости от количества действующих вредных веществ?
Нет, это предположение неправильно. Можно в одной висячей капле воды иметь одновременно стилонихию, спиростомум и опалину. Поднесём к этой капле кашицу из луковицы лука. Инфузории умрут по-разному: одна исчезнет, другая распадётся на зёрнышки, у третьей же закрепится на несколько часов её строение.
He менее интересно для теории и практики и то обстоятельство, что фитонциды разных растений вызывают у одного и того же вида инфузорий различные химические явления, приводящие к их смерти. Это и понятно. Фитонциды разных растений имеют очень своеобразный состав. Поэтому одни фитонциды могут подавить дыхание, другие — растворить поверхностные слои протоплазмы, третьи — изменить какие-либо важные для жизни составные части протоплазмы (ферменты и пр.).
Рис.16. Смерть трубача под влиянием фи т онцидов.
а — нормальный трубач; б — д — смерть трубача под влиянием летучих фитонцидов: б — лука (последовательные стадии разрушения), в — кедровой сосны, г — паров эфирного масла полыни, д — летучих фитонцидов чёрной смородины.
Смерть произойдёт во всех случаях, но характер умирания, картина предсмертных явлений будут различны. Грубое подобие этого можно усмотреть и в умирании многоклеточных организмов и даже высших животных, у которых смерть может наступить от остановки дыхания, от разрыва крупных сосудов и по многим другим причинам. Сколь непохоже реагирует один и тот же организм на действие различных фитонцидов, можно видеть на рис.16.
Рис.17. Умирание стилонихии под влиянием летучих
фитонцидов лука. Объяснение а —в см. в тексте.
Мы сняли под микроскопом кинофильм о влиянии летучих фитонцидов лука на инфузорию стилонихию. На рис.17 представлены отдельные последовательные стадии её смерти.
Сначала начинает умирать передний конец инфузории, тот, которым она движется. Распад тела быстро распространяется к заднему концу. По поверхности тела этой инфузории имеются реснички, благодаря движениям которых движется и вся инфузория. Интересно, что движение инфузории не прекращается до полного её распада! Остающиеся лишь небольшие участки тела продолжают двигаться даже более ускоренно, чем в норме.
Ещё более удивительно явление, пока загадочное для науки: инфузория почти полностью исчезает, лизируется. На рис.17, в, который представляет один из заключительных этапов смерти, видно, что от инфузории остались лишь небольшие количества мельчайших зёрнышек. Это скорее даже не частички тела инфузории, а различные нерастворимые включения в её протоплазме.
Гибель микро- и микроорганизмов от фитонцидов апельсина, лимона и мандарина
Для того чтобы рассмотреть подробнее губительное действие фитонцидов на протозоа и другие организмы, можно с одинаковым успехом взять многие растения: дуб, чёрную смородину, хвойные и т.д. Но мы на этот раз остановимся на цитрусовых.
Плоды цитрусовых с давних пор считались полезными для человека. Плоды апельсинового, лимонного и мандаринового деревьев в народной медицине разных стран пользовались большим почётом в качестве лекарственных веществ.
Ещё полторы тысячи лет назад в китайских книгах давался рецепт приготовления чая с лимоном. В XVII веке в Китае лимон применялся как средство для излечения ран и лёгочных заболеваний. Китайцы много сотен лет назад установили пользу лимона при цинге. В нашем столетии благодаря открытию витаминов догадки народной китайской медицины стали научно обоснованными, и сейчас никто не сомневается, что среди витаминных растений одними из лучших против цинги являются плоды лимона.
Научная медицина использует плоды цитрусовых при лечении желудочно-кишечного тракта и дыхательных путей. Применяли эти целебные плоды и для лечения гнойных ран, язв желудка и кишечника, при брюшном тифе и ангине.
В последние годы стали известны фитонцидные свойства цитрусовых. Летучие фитонциды листьев и плодов лимонного, мандаринового и апельсинового деревьев обладают бактерицидными свойствами в отношении многих бактерий, патогенных и безвредных для растений, животных и человека. Фитонциды цитрусовых, в частности, убивают некоторые формы дизентерийных микробов.
Займёмся, однако, не бактерицидными, а протистоцидными свойствами фитонцидов цитрусовых.
Возьмём плод лимона, апельсина или мандарина. Острой бритвой срежем приблизительно полусантиметровую площадку кожуры. Разрежем этот кусочек на ещё более мелкие кусочки или раздавим его в ступке, чтобы создалась большая поверхность испарения. Как и в опытах с другими растениями, положим полученную растительную кашицу на дно чашки Петри (или в любую другую подобную посуду), а на внутренней поверхности крышки поместим висячую каплю сенного отвара[7] с простейшими, например инфузориями. Все они погибнут.
Смерть их наступит в разное время в зависимости от состояния плодов, степени измельчения материала, объёма посуды и т.п. Можно взять такое количество источника фитонцидов и создать такие условия, что гибель простейших наступит в первые секунды воздействия; но можно и растянуть их умирание даже на несколько десятков минут.
Опыты эти очень просты, и каждый, располагая несложным оборудованием, может повторить их.
Поставим теперь следующий опыт. Выдавим в чашку Петри сок из мякоти лимона, апельсина или мандарина. Так же, как и в предыдущих опытах, поместим на внутреннюю поверхность крышки каплю сенного отвара с теми же видами инфузорий, которые, как мы убедились, очень нестойки к летучим фитонцидам кожуры цитрусовых. Мы обнаружим удивительное явление: сколько бы мы ни налили сока мякоти плодов, никакого действия летучие вещества сока на инфузорий не окажут. Даже через сутки инфузории не погибнут. Вывод очевиден: летучие фитонциды мякоти цитрусовых плодов не обладают протистоцидными свойствами.
Но это не значит, конечно, что летучие вещества мякоти лишены совершенно фитонцидных свойств. Нет, они хорошо убивают многих бактерий, в том числе и вредных для человека. В нашей лаборатории доказано, что уже при 30-минутном воздействии летучих фитонцидов лимонной мякоти на культуру дизентерийной палочки количество выросших колоний составляет лишь 28 процентов по сравнению с контрольными, не подвергавшимися воздействию фитонцидов. Доказано тормозящее влияние летучих веществ плодовой мякоти цитрусовых на плесневые грибки. Отмечено отчётливое бактериоубивающее действие летучих веществ в отношении, например, золотистого стафилококка и бактерии цитрипутеале, вызывающей болезни цитрусовых и других растений.