Глава 3. Результаты собственных исследований
3.1.Исследование эффектов введения антагонистов орексина в желудочки мозга для подкрепляющих свойств психоактивных веществ
Крысам самцам Вистар вживляли биполярные электроды в латеральный гипоталамус для исследования реакции самостимуляции вкамере Скиннера и микроканюли в левый боковой желудочек для изучения центральных эффектов действия антагониста орексина SB-408124 (1 мкл на инъекцию) на подкрепляющие свойства фармакологических веществ. Исследования показали, что при системном введении фенамин (1 мг/кг, в/бр) на 32% повышал частоту нажатий педали в камере Скиннера (т.е. число нажатий педали за 10 мин) при регистрации реакции самостимуляции латерального гипоталамуса (табл. 1,2,3). А введение антагонистов орексина в обоих дозах (1мкг/мкл;10 мкг/мкл) в желудочек мозга снижало эффекты фенамина (число нажатий на педаль) (табл. 1,2).
Табл. 1. Действие фенамина при внутрибрюшинном введении, антагониста орексина SB-408124 (1мкг), рекомбинантного антагониста OX1R рецепторов Orexin B18-28 (1мкг) при внутрижелудочковом введении и их комбинации на реакцию самостимуляции у крыс.
Вещество, доза
Число нажатий на педаль за 10мин
Пороги самостимуляции
(мкА)
До введения
После введения
До введения
После введения
Фенамин 1мг/кг, в/б
144,5±19
100%
216,25±26*
132%
143,25±18
100%
125±22
85,9%
SB-408124 1мкг/мкл, в/ж
78±10
100%
76±9
101%
89±11
100%
88±11
99%
Фенамин 1мг/кг, в/б + SB-408124 1мкг/мкл, в/ж
116,5±15
100%
129,75±18
115%
80±10
100%
68,5±12
96,8%
Orexin B18-28 1мкг/мкл, в/ж
125,9±16
100%
123,3±16
98,8%
121.3±15
100%
120±15
100,1%
Фенамин 1мг/кг, в/б + Orexin B18-28 1мкг/мкл, в/ж
264,4±33
100%
278,5±35
113,4 %
214,4±28
100%
212,5±30
103,8%
Напротив, оба антагониста орексина (1 мкг, в/ж) достоверно не меняли основных показателей при регистрации реакции самостимуляции в камере Скиннера (как числа нажатий на педаль, так и порогов реакции самостимуляции). При введении SB-408124 (1мкг, в/ж) с фенамином (1мг/кг, в/б), наблюдается снижение эффектов фенамина. Так число нажатий на педаль за 10 минут, относительно показателей фенамина (1мг/кг, в/б), снижается со 132% до 115%, а пороги самостимуляции повышаются с 85,9% до 96,8%. При введении антагониста орексина Orexin B18-28 (1мкг, в/ж) с фенамином (1мг/кг, в/б), также наблюдается снижение эффектов фенамина. Число нажатий на педаль за 10 минут, относительно показателей фенамина (1мг/кг, в/б), снижается со 132% до 113,4%, а пороги самостимуляции повышаются с 85,9% до 103,8%.
Табл. 2. Действие фенамина при внутрибрюшинном введении, антагониста орексина SB-408124 (10мкг), Orexin B18-28 (10мкг) при внутрижелудочковом введении и их комбинации на реакцию самостимуляции у крыс.
Вещество, доза
Число нажатий на педаль за 10мин
Пороги самостимуляции
(мкА)
До введения
После введения
Довведения
После введения
Фенамин 1мг/кг, в/б
144,5±19
100%
216,25±26*
132%
143,25±18
100%
125±22
85,9%
SB-408124 10 мкг/мкл, в/ж
118±13
100%
121±10
103%
62±8
100%
58,7±5
98%
Фенамин 1мг/кг, в/б + SB-408124 10 мкг/мкл, в/ж
86,5±7
100%
97,1±9
109,6%
110±14
100%
118,3±15
105,1%
Orexin B18-28 10 мкг/мкл, в/ж
93,9±10
100%
92,5±7
99,3%
141,7±11
100%
145±13
103%
Фенамин 1мг/кг, в/б + Orexin B18-28 10 мкг/мкл, в/ж
134,8±16
100%
145,5±10
106,4 %
82,5±8
100%
86,1±6
103%
В дозе 10мкг/мкл оба антагониста орексина достоверно не изменяли основных показателей при регистрации реакции самостимуляции в камере Скиннера (как числа нажатий на педаль, так и порогов реакции самостимуляции). Однако при введении SB-408124 (10мкг, в/ж) с фенамином (1мг/кг, в/б), наблюдается явное снижение эффектов фенамина. Так число нажатий на педаль за 10 минут, относительно показателей фенамина (1мг/кг, в/б), снижается со 132% до 109,6%, а пороги самостимуляции повышаются с 85,9% до 105,1%. При введении антагониста орексина Orexin B18-28 (10мкг, в/ж) с фенамином (1мг/кг, в/б), также наблюдается снижение эффектов фенамина. Число нажатий на педаль за 10 минут,относительно показателей фенамина (1мг/кг, в/б), снижается со 132% до 106,4%, а пороги самостимуляции снижаются со 122,9% до 103%.
Табл. 3. Действие фенамина при внутрибрюшинном введении, SB-408124 (0,1мкг), Orexin B18-28 (0,1мкг) при внутрижелудочковом введении и их комбинации на реакциюсамостимуляции у крыс.
Вещество, доза
Число нажатий на педаль за 10мин
Пороги самостимуляции
(мкА)
До введения
После введения
Довведения
После введения
Фенамин 1мг/кг, в/б
144,5±19
100%
216,25±26*
132%
143,25±18
100%
125±22
85,9%
SB-408124 0,1 мкг/мкл, в/ж
103,6±10
100%
105,1±9
101%
94±10
100%
92±10
99%
Фенамин 1мг/кг, в/б + SB-408124 0,1 мкг/мкл, в/ж
126,4±16
100%
149,9±17
129%
90±10
100%
104±12
117,6%
Orexin B18-28 0,1 мкг/мкл, в/ж
95,7±12
100%
94,9±10
98,3%
85±10
100%
86,4±7
101 %
Фенамин 1мг/кг, в/б + Orexin B18-28 0,1 мкг/мкл, в/ж
154,7±21
100%
203,4±18
133 %
135±14
100%
154,6±18
118,3%
В дозе 0,1 мкг/мкл оба антагониста орексина достоверно не изменяли основных показателей при регистрации реакции самостимуляции в камере Скиннера (как числа нажатий на педаль, так и порогов реакции самостимуляции). При введении антагонистов орексина (0,1 мкг, в/ж) с фенамином (1мг/кг, в/б), не наблюдалось достоверное изменение эффектов фенамина (как числа нажатий на педаль, так и порогов реакции самостимуляции).
Опыты с условной реакцией предпочтения места проводили в прямоугольной двухкамерной экспериментальной установке размером 35*35*30 см, стороны которой различались цветом (темный и светлый) и текстурой пола и были разделены перегородкой с опускающейся и поднимающейся дверцей. Исследования влияния на выработку предпочтения места и экспрессию выработанного предпочтения места показали, что при внутрибрюшинном введении фенамин (1мг/кг) значительно повышал время нахождения животного в отсеке, в котором вводился препарат. На фоне блокады рецепторов орексина его антагонистами в дозах 1мкг и 10мкг эффект фенамина проявлялся в меньшей степени (табл. 4,5,6,7).