Эта работа трудная и может потребовать много времени, но при наличии соответствующих возможностей и достаточного числа работников можно было бы свести до вполне приемлемых масштабов как самый объем работы, так и потребное на нее время. Затраты средств могут быть большими, хотя они будут значительно меньше, чем средства, расходуемые на разрешение многих других, менее важных проблем. Ежегодные убытки, наносимые картофелеводству нематодой, оцениваются в 2 млн. фунтов стерлингов, и наши фермеры вправе ожидать, что будут испытаны все возможные способы снижения этих поистине устрашающих потерь.
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
СБОР, КУЛЬТИВИРОВАНИЕ И ИССЛЕДОВАНИЕ ХИЩНЫХ ГРИБОВ
Хищные грибы можно легко получить почти из всех типов гниющего растительного материала, например листового перегноя, садового компоста, гниющей древесины и т. д. Они обычно находятся также в навозе, а многие из них можно обнаружить в зарослях мха, особенно у основания стеблей, где растения соприкасаются с почвой.
Материал, собранный в поле, следует принести в лабораторию в закрытых сосудах (в пробирках или жестянках из-под табака), чтобы сохранить его влажность. После сбора его возможно быстрее следует использовать для закладки первичных культур. Если образцы достаточно влажны, их можно без опасения хранить в течение одной или двух недель, а более крупные образцы — и дольше. Если в течение одного обхода взято несколько образцов, то нужно следить за тем, чтобы в процессе сбора не занести хищные грибы или их споры из одного образца в другой; лопатка или нож, используемые при сборе, должны быть после каждого сбора тщательно очищены и, если возможно, протерты денатурированным спиртом. Лучше всего пользоваться шпателями из деревянных щепок, которые можно выбрасывать после взятия каждого образца. Если пробирки или жестянки раньше не использовались для сбора хищных грибов, их стерилизовать не нужно, но если они используются вторично, то их необходимо вымыть и простерилизовать путем кипячения или в автоклаве. Не следует забывать о том, что и руки сборщика также могут случайно занести материал из одного образца в другой.
Образцы следует этикетировать в момент сбора и, помимо этикетки на пробирке или коробке, хорошо вложить дополнительную этикетку внутрь пробы; если она будет написана карандашом, то независимо от степени влажности образца останется разборчивой. В полевую записную книжку следует записать время сбора, тип материала, место — предпочтительно со ссылкой на карту — и все другие детали, которые позднее смогут иметь какое-либо значение, например характер окружающей растительности, погодные условия и т. п. Просто поразительно, какое значение могут приобрести мелкие детали такого рода спустя годы после того, как образец был собран, исследован и забыт. Поэтому сведения об образце следует как можно скорее переписать из полевой книжки в более надежное место, потому что страницы полевой книжки почти неизбежно разрываются на этикетки для образцов, используются для разжигания трубки или иным путем оказываются потерянными для науки.
Для приготовления первичных культур хищных грибов из исходных образцов следует использовать бедную питательную среду для подавления роста более крупных видов плесневых грибов. Особенно низким должно быть содержание сахара. Хорошую среду можно приготовить на кукурузном агаре. Для этой цели берется: измельченных зерен кукурузы 20 г, агара 20 г и водопроводной воды 1000 мл.
Измельченные зерна кукурузы заливают 1200 мл водопроводной воды и нагревают в течение часа при температуре 70—80°. После охлаждения и оседания осадка 1000 мл жидкости, находящейся на поверхности, фильтруют, если нужно, через стеклянную вату, добавляют агар и расплавляют его в автоклаве. Литр среды удобнее всего разлить в 3 конические колбы емкостью 500 мл, которые затем закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин. под давлением 1 ат.
Слой агара в чашках для первичных культур хищных грибов не должен быть очень толстым (глубоким), так как это может затруднить последующие наблюдения; вопреки обычным правилам агар нужно заливать в колбы горячим, чтобы образующаяся при этом конденсационная влага предохранила его от слишком быстрого высыхания. Так как первичные культуры приходится выдерживать по крайней мере 3 месяца, то предохранение их от высыхания всегда является проблемой. Для сохранения влажности культуры полезно держать под колпаком или в закрытой жестяной коробке.