Питательную агаровую среду можно приготовить в кухне, используя для нее медицинские склянки. Кукурузную муку можно получить у любого продавца кукурузы или можно заменить ее сухим горохом, который кипятят в водопроводной воде и полученную жидкость сливают после того, как все частицы осядут. Отвар готовят из расчета одной горсти гороха на 0,56 л воды. Наиболее легкий способ приготовления горохового агара заключается в том, что 7,1 г агара растворяют при кипячении в 280 куб. см воды и добавляют к нему 0,56 л горохового экстракта. Полученную среду можно разлить в медицинские склянки, закрыв их горлышки ватой вместо корковых пробок.
Если агар достать трудно, то вместо него можно использовать желатин из расчета 85 г на каждые 0,56 л готовой среды. Один из моих друзей, страстный любитель, не имея возможности во время войны достать ни агара, ни желатина, сам приготовлял прекрасную среду путем кипячения в воде «ягод» тисса.
Медицинские склянки и их содержимое должны быть затем простерилизованы. Этот процесс можно легко осуществить в сосуде для варки на пару под давлением, если таковой имеется; давление в 6,8 кг в течение 20 мин. бывает вполне достаточным. Если такого сосуда нет, то стерилизацию можно с одинаковым успехом провести в обычном домашнем котле для варки на пару, газовом медном котле или даже в глубокой кастрюле с крышкой; разница заключается лишь в том, что в этих случаях применяется «прерывистый» способ: материал стерилизуется по 30 мин. в день в течение 3 последовательных дней, а между обработками охлаждается[37].
При отсутствии чашек Петри их можно заменить маленькими мелкими чашками из стекла пирекс с крышками. До использования их следует простерилизовать путем нагревания в течение 30 мин. в печи при 165°. Если стерилизацию проводят в обычных кухонных условиях, то любитель должен попросить свою жену подготовить ему «довольно холодную духовку».
При разливании стерильной питательной среды в стерильные чашки — независимо от того, будут ли это настоящие чашки Петри или какие-либо импровизированные сосуды — необходимо соблюдать меры предосторожности против ее загрязнения. Среду расплавляют или в котле для варки на пару, или путем погружения сосуда со средой в кипящую воду и, когда агар расплавится, тонким слоем наливают его в каждую чашку. При вынимании ватной пробки горлышко колбы или бутылки нужно 2—3 раза провести сквозь пламя, чтобы убить все споры и бактерии на его краях, а крышку чашки следует приподнять не больше, чем требуется для наливания в чашку среды. Во время разливания среды крышку чашки держат над нижней ее частью, чтобы предупредить попадание частиц пыли из воздуха на стерильную внутреннюю часть чашки. После окончания разливки чашки оставляют в покое на 30 мин. или дольше, чтобы среда застыла, после чего они готовы к употреблению. Методика инокулирования чашек гниющим растительным материалом и т. п. была уже описана. Совершать длинные экскурсии в поисках подходящего материала нет никакой надобности, по крайней мере в первое время, потому что в кучах компоста, имеющихся в собственном саду любителя, вероятно, можно найти несколько различных видов. Методика исследования культур после начала их роста описана в приложении 1.
Эти простые методы вполне обеспечат успех работы, я сам применял их[38].
ЛИТЕРАТУРА
Я не пытаюсь привести здесь исчерпывающий список литературы по хищным грибам, а хочу лишь указать читателю некоторые работы, дающие общие представления о хищных грибах или об их использовании для борьбы с нематодами. Для определения различных видов можно пользоваться работами Дречслера, помещенными в журналах: Mycologia, Phytopathology, The Journal of the Washington Academy of Science и The Bulletin of the Torrey Botanical Club. Английские работы по хищным грибам опубликованы в журнале The Transactions of the British Mycotogical Society. Очень ценным пособием для лиц, изучающих эту проблему, является сводка Доллфуса; она содержит обзор всей работы, проделанной по хищным грибам, истребляющим нематод, вплоть до конца 1945 г., и богато иллюстрирована.
38
Начинающие любители и студенты найдут дополнительные многочисленные и полезные методические указания в книгах: Н. А. Наумов, Методы микологических и фитопатологических исследований, Л., 1937; Т. Л. Доброзранова, Руководство к практическим занятиям по фитопатологии, М.—Л., 1949; В. Л. Омелянский, Практическое руководство по микробиологии, М.—Л., 1940; Г. И. Роскин, Микроскопическая техника, М., 1946. Особенно много ценных сведений и указаний непосредственно по хищным гельминтофагам содержится в книге Ф. Ф. Сопрунова, Хищные грибы — гифомицеты и их применение в борьбе с патогенными нематодами, Изд. АН Туркменской ССР, 1—366, Ашхабад, 1958. — Прим. ред.