В начале 1905 года в Украине в забастовках участвовали рабочие предприятий Екатеринослава, Харькова, Киева, Николаева, Каменского, Мариуполя, десятки тысяч шахтеров и железнодорожников.
Революция дала мощный толчок процессу профессионального объединения рабочих. Все чаше стали говорить о создании заводских комиссий и других форм профессиональных объединений.
Первое письменное соглашение о формировании заводской комиссии (комиссии уполномоченных) было заключено 1 февраля 1905 года между рабочими и директором Харьковского паровозоремонтного завода (теперь — ПО «Завод им. Малышева»). Соглашению предшествовали забастовка, избрание комиссии рабочих, ее переговоры с администрацией. Выборная комиссия по этому соглашению имела право разбирать конфликты между рабочими и администрацией, выяснять причины увольнений, участвовать в рассмотрении вопросов об изменении расценок сдельных работ, при необходимости вести переговоры с директором завода. Это соглашение по существу являлось коллективным договором между рабочими и предпринимателями.
В борьбу за образование профсоюзов активно включились железнодорожные служащие и рабочие. В Киеве во время февральской забастовки в управлении Юго-Западной железной дороги служащие потребовали свободы собраний, союзов и стачек, создания комиссии для разрешения конфликтов с администрацией дороги. Администрация согласилась удовлетворить эти требования, но своего обещания не выполнила, уволив организаторов забастовки. Служащие направили А. Шлихтера своим делегатом в Москву на состоявшийся в апреле 1905 года учредительный съезд союза железнодорожников. Съезд образовал профессиональную организацию — Всероссийский железнодорожный союз и избрал его руководящий орган — Центральное бюро.
После I съезда Всероссийского железнодорожного союза завершилось объединение работников Харьковского узла. Здесь был образован Южнорусский профессиональный железнодорожный союз. С июня 1905 года начал действовать нелегальный союз рабочих и служащих Екатерининской железной дороги. Профсоюзы Харьковского узла и Екатерининской дороги, как и Юго-Западный отдел, вошли в состав Всероссийского железнодорожного союза.
Профсоюзы железнодорожников Украины приняли участие во II съезде Всероссийского железнодорожного союза, состоявшегося в Москве в июле 1905 года и приведшего к его расколу. От Всероссийского железнодорожного союза отмежевался Южно-русский профессиональный железнодорожный союз, установивший организационную связь с союзом железнодорожных служащих Московского узла.
Осенью 1905 года первая российская революция вступила в период высшего подъема, обусловившего дальнейший рост профсоюзного движения и усиление тенденций к его централизации.
Инициатором всероссийского объединения профессиональных союзов выступили профсоюзы Харькова. Состоявшееся в начале сентября 1905 года совещание харьковских профсоюзов избрало первый в России межсоюзный руководящий орган — Центральное бюро профессиональных союзов (ЦБПС), поставив перед ним задачу содействовать развитию профсоюзов в городе и его окрестностях. Харьковское и Петербургское региональные ЦБПС установили связь с профсоюзами Москвы и других городов, определили место проведения и повестку дня будущего съезда или конференции.
I Всероссийская конференция профессиональных союзов прошла 6 октября 1905 года. Ее делегаты высказались за всемерное развитие и укрепление профсоюзов как массовых рабочих организаций.
В это время в Москве началась всеобщая забастовка. Первыми ее поддержали рабочие и служащие Московско — Казанской железной дороги. Затем стачку объявили рабочие и служащие других железных дорог. 11 октября 1905 года бастовало 14 дорог, а к 17 октября стачка приобрела всероссийский размах. В ней приняли активное участие рабочие и служащие Юго-Западной, Екатерининской, Харьково — Николаевской, Курско — Харьково — Севастопольской, Юго-Восточной и других железных дорог.
Октябрьская всероссийская стачка дала новый импульс массовому профессиональному движению, ускорила создание в Украине новых организаций профсоюза железнодорожников. В октябре-ноябре дорожные и местные отделения Всероссийского союза железнодорожников образовались на Курско — Харьково — Севастопольской, Харьково — Николаевской, Киево — Полтавской и других дорогах.
Рабочее движение во главе с профсоюзами наиболее активно проявило себя во время декабрьской политической стачки и вооруженного восстания в Москве. Забастовка охватила все железные дороги и промышленные центры Украины. 8 декабря была объявлена политическая стачка на Екатерининской железной дороге.
В ряде городов на линиях Харьково — Николаевской, Курско — Харьково — Севастопольской, Юго-Западной и других дорог политической стачкой руководили Советы и созданные при участии профсоюзов забастовочные комитеты. В Харькове был образован стачечный комитет рабочих и служащих Курско — Харьково — Севастопольской дороги. 9 декабря забастовали рабочие Харьково — Николаевской дороги. Союз железнодорожников образовал временное управление, которому подчинялись забастовочные комитеты в Полтаве, Лозовой, Знаменке, Николаеве и на других станциях.
После поражения декабрьского вооруженного восстания начался период спада революционного движения. Прекратилась деятельность большинства организации железнодорожного и почтово-телеграфного союзов. Часть профсоюзов, не успев окрепнуть, распалась, часть перешла на нелегальное положение. Но и в этих условиях по мере оживления рабочего движения профсоюзы возобновляли свою деятельность.
Убедившись в невозможности подавить профсоюзы, власти решили изменить тактику — перевести союзы в «законное» русло легальных, ограниченных жесткими правилами подконтрольных организаций. С этой целью правительство активизировало начатую ранее разработку так называемых «Временных правил о профсоюзных обществах», которые были утверждены 4 марта 1906 года. «Временными правилами», или законом от 4 марта 1906 года, прежде всего ограничивался круг рабочих и служащих, которым разрешалось объединяться в союзы. Этой возможности были лишены, в частности, железнодорожники.
В декабре 1906 года делегаты профсоюзов Харьково — Николаевской, Курско — Харьково — Севастопольской и Екатерининской дорог приняли участие в III съезде Всероссийского железнодорожного союза, нелегально проходившем в финском городе Таммерфорсе. Центральным на съезде был вопрос о пересмотре платформы Союза. Съезд принял платформу, ограничивающую классовую борьбу железнодорожников рамками экономических требований в пределах железнодорожной корпорации.
С осени 1910 года началось новое оживление рабочего движения. Забастовки, митинги и демонстрации рабочих состоялись в Киеве, Екатеринославе, Одессе, Харькове, Николаеве и других городах.
Несмотря на противодействие властей, в 1913–1914 годах продолжалась борьба за образование новых профсоюзов. Профсоюзы Украины принимали активное участие в избирательной кампании в IV Государственную думу. В сентябре 1912 года на первой стадии выборов от Екатеринославской и Харьковской губерний в уполномоченные прошли члены профессиональных союзов. На второй стадии выборов были избраны депутаты: от Екатеринославской губернии — Г. Петровский, от Харьковской — рабочий депо станции Основа М. Муранов.
Начало 1917 года в России ознаменовалось дальнейшим подъемом революционного движения. Ярким проявлением протеста рабочих и солдат против политики Временного правительства стали массовые антивоенные демонстрации и митинги, прокатившиеся по всей стране в апрельские дни, 1917 года. Они прошли в Киеве, Харькове, Екатеринославе, Луганске, на рудниках и шахтах Донбасса.
Вот характерный протест, выраженный в заявлении рабочих и служащих депо Основа на митинге 22 апреля 1917 года: «Мы, служащие, мастеровые и рабочие Северо- Донецкой железной дороги при депо Основа, собравшись в количестве 1600 человек и обсудив ноту Временного правительства к союзникам о продолжении войны до победного конца, находим, что этой нотой Временное правительство нарушило свою клятву исполнять волю народа и тем самым, лишившись его доверия, должно отойти от власти, на которую его поставил революционный народ. Мы считаем, что единственным правительством является Совет рабочих и солдатских депутатов, который является представителем трудового народа, и который один может правильно разрешить вопрос о войне и мире».